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                山東漢景生物科技有限公司是專業植物組培試劑生產廠家,主營植物組培試劑、組培室建設、組培設備、組培架等。
                專業植物組培試劑生產廠家

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                組培試劑公司展示
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                組培消毒常用試劑 無菌及無菌操作!

                優質內容 來源:山東組培試劑公司 時間:2022-03-10 23:16:20 瀏覽:0

                      今天我們來講一下組培消毒常用試劑 無菌及無菌操作!組培消毒試劑:次氯酸鈉(22元500ml),甲醛溶液(12元500ml ),高錳酸鉀(22元500g),升汞(350元250g),新潔爾滅(12元500ml),過氧乙酸(28元一對甲溶液乙溶液各500ml) 這些店內都有銷售,需要直接咨詢客服!淘寶店不準銷售,只有這里告訴大家噢!

                      一、 滅菌及無菌操作

                      植物組織培養成敗的關鍵:保證無菌,避免污染。

                      器皿和用具的洗滌(P28):玻璃器皿洗滌方法:先用堿洗,即用肥皂粉刷洗,用清水清洗,晾干。

                      難洗的器具:需用鉻酸-硫酸混合洗滌液浸泡,浸泡后用自來水沖洗,最后用蒸餾水沖洗。

                      二、 培養基滅菌及培養基、植物材料的消毒

                      (一)培養基的滅菌(高壓滅菌)

                      一般程序:

                      1.按實驗需求配制&hellip;&hellip;

                      2.&hellip;&hellip;加水,防止干燒。

                      3.將培養基瓶,所用的培養皿,接種用的器具,蒸餾水等需要滅菌的東西放入鍋內。

                      4.關上鍋蓋,擰緊。

                      5.打開電源,開始加熱,至100℃,3~5min。

                      6.滅菌鍋自動關上排氣閥,開始加壓,溫度繼續上升,溫度到達121℃。

                      7.維持此溫度,壓力維持0.1~0.2MPa下,保持10-20分鐘。

                      8.時間到后自動降壓降溫至100℃,壓力為零。

                      9.在94℃時切斷電源,可打開鍋蓋,取出培養基冷卻,滅菌完畢。

                      滅菌最少時間:

                      mLmin

                      20~5015

                      75~15020

                      250~50025

                      100030

                      注意事項:①在滅菌之前一定要檢查鍋中的水位,嚴禁干燒,以免造成事故。

                     ?、跍缇斑€需檢查排氣閥是否關上。

                     ?、壑挥挟斿佒袎毫榱銜r才能打開鍋蓋,否則會有危險。

                     ?、苠亙葢粲锌障?,不能太滿。

                     ?、轀缇鷷r間不宜過長,也不可以超過滅菌鍋規定的壓力范圍。

                      (二)物體表面滅菌

                      滅菌方式:噴霧、涂抹殺菌。

                      范圍:桌面、墻面、雙手、材料表面。

                      消毒劑:70%酒精;1-2%來蘇水;0.25-1%新潔爾滅,洗衣粉;吐溫-80。

                      (三)接種工具滅菌

                      用前干熱滅菌 160-180℃,1.5-2.0h

                      用前濕熱滅菌 121℃,20-30min

                      接種前用酒精棉球檫試,侵入95%酒精液中,并在酒精燈上滅菌。

                      (四)實驗服、口罩、濾紙滅菌

                      濕熱滅菌 121℃,20-30min

                      &hellip;&hellip;

                      (五)接種室滅菌

                      紫外燈照射(接種室、超凈臺、接種箱):波長260nm,距離小于1.2m,2.-30min。

                      臭氧滅菌機:1~2h。

                      熏蒸滅菌:5-8mL/m3甲醛+5g/m3高錳酸鉀;冰醋酸。

                      接種臺噴霧消毒:75%酒精。

                      (六)培養室滅菌

                      新建培養&hellip;&hellip;

                      隔2-5天用洗衣粉水或來蘇水拖地一次,用高錳酸鉀擦。

                      三、無菌操作

                      滅菌:用物理或化學方法,殺死物體表面積和孔隙內一切微生物或生物體,即所有有生命的物質全部殺死。

                      消毒:殺死、  消除或抑制部分微生物,使之不發生作用。

                     

                滅菌劑名稱

                使用濃度%

                清洗難易

                滅菌時間

                滅菌效果

                酒精

                70-75

                0.1-3

                Ca(ClO)2

                9&mdash;10

                5&mdash;30

                氯化汞

                0.1-0.2

                較難

                2-10

                最好

                     

                常用化學消毒劑:

                      酒精滅菌的原理:

                      1) 酒精具有較強的穿透能力和殺菌力,它使細菌蛋白質變性。使用的濃度一般為70&mdash;75%。

                      2) 處理時間15&mdash;30s,不宜太久,因此細胞容易收縮脫水。它具有浸潤和滅菌雙重作用,適用于表面消毒;

                      3) 在乙醇溶液中加入0.1%的酸或堿,可提高殺菌效果。

                      植物材料消毒程序:1)清洗(流動自來水沖洗數小時,洗衣粉毛刷等清洗);2)滅菌劑浸泡滅菌;3)無菌水清洗4、5次擦干;4)加表面活性劑(吐溫-20或吐溫-80,加強表面活性劑,磁力攪拌,超聲振蕩)。

                      常規二次消毒法:材料先放入70%的乙醇中,約30s后再在0.1%的氯化銀中浸泡,2&mdash;0min,或在2%次氯酸鈉中浸泡20min,然后用無菌水沖洗3、4次。

                      四、廣譜實驗法

                      在廣譜試驗中,把培養基中所有組分分為4大類:無機鹽、有機物質、生長素、細胞分裂素

                      4類物質各3種濃度的自由組合即構成了3項包括81個處理的實驗。

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